肉的宰后嫩化首要归因于肌原氯纶组成部分的损坏，肌原氯纶组成部分是由内源性蛋清质电离酶吸附肌原氯纶和人体生殖组织人体细胞核骨架蛋清质带来的。与十多年来一直都在是私信大家都讨论的钙蛋清质酶各不相同，胱天蛋清质酶（caspases）近几天变为感喜好得话题。胱天蛋清质酶在人体生殖组织人体细胞核凋亡的实行时期起着至关更重要的角色，当中caspase-3在死了蛋清质电离中的角色是一定要多方位面和复杂性的，由此比较适合进一次探析。S-亚硝基化用调准钙脱离、动能排泄、蛋清质质吸附和人体生殖组织人体细胞核凋亡来调准口感，例如嫩度和持水工作能力。下一步探析显示S-亚硝基化能能降低依赖感线粒体的caspase-3级联作用，这可以是脂肪人体生殖组织人体细胞核凋亡和牛羊肉产品变动的因为。caspase-3的探析重心是其与人体生殖组织人体细胞核凋亡的内在联系，当然，不多有探析研讨S-亚硝基化调准caspase-3的工作机制。

2024年9月由广州农耕大学考研张万刚讲师团队协作在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生态学为该研究提供了亚硝基化绘制组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文翻译版头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊论文：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2025年引响指数公式：5.7

刊登时候：2024年9月

客服工作单位：南京农业大学

的研究相关材料：蛋白

拜谱提供数据技巧：亚硝基化修饰组学

高技术线路：

一、研究分析可是

01.Caspase-3化学活化

现在尚不清理NO对caspase-3的调节的功效可不可以归因于NO介导的S-亚硝基化，有所不同盐浓度均值的GSNO作为一个外源性NO供给，以介导caspase-3的身体S-亚硝基化。最终结果体现了，与就没有GSNO的组相信，100、200和400μM GSNO组的caspase-3吸附性相关系数调低（图1），与之前新闻稿同步。GSNO补救调低caspase-3吸附性的自身病因仍仍待系统阐述。

图1 不同的渗透压的GSNO处里对caspase-3活力性的决定

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化水平

钻研Caspase-3的亚硝基化因素，以具体分析GSNO对Caspase-3的反應性。经GSNO治疗后，判断到caspase-3蛋白质S-亚硝基化屈服强度加剧（图2）。这类效果证实，外源性GSNO教育培养可完成诱导型caspase-3的身体之外S-亚硝基化。最让人特别的是，在不会GSNO有的比对组中判断到有一个变弱的S-亚硝基化带，这证实caspase-3可以发生内源性的S-亚硝基化。凡此种种，本钻研中caspase-3的S-亚硝基化因素较高，而caspase-3的几丁质酶削减，这与的时候的钻研相一致。其实，caspase-3的特情人S-亚硝基化淡化位点尚不看清楚，还需用进一大步的宇宙探索。

图2 GSNO加工处理对caspase-3S-亚硝基化层次的作用

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化呈现组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码队列。橙色标出的编码队列表明S-亚硝基化肽，颜色标出的C表明S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3挥发结蛋白质

结核球淀粉酶酶用于一类更为重要的内部骨架核球淀粉酶酶，在稳定肌内部格局的的格局的完成篇性和抽缩性方便起着更为重要效果，的研究S-亚硝基化caspase-3对结核球淀粉酶酶分解的的敏各样拥有更为重要寓意。与Std（未用胱天核球淀粉酶酶酶-3和GSNO孵育的默认值肌化学食物纤维核球淀粉酶酶）组比较，0 μM GSNO组（肌原化学食物纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完成篇结核球淀粉酶酶硫水分占比特殊影响，显示信息caspase-3对结核球淀粉酶酶拥有暗藏的核球淀粉酶酶电离专业能力。在GSNO孵育后，完成篇结核球淀粉酶酶的硫水分占比强烈增大（P < 0.05）。前者，当GSNO有机废气浓度偏高时，完成篇结核球淀粉酶酶的硫水分占比持续时间调整（P < 0.05）（图5）。这发现证明，SNO绘制的caspase-3以平均水平依耐的途径阻止结核球淀粉酶酶的分解。

图5.S-亚硝基化caspase-3溶解结血清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3挥发肌钙血清-T

肌钙球淀粉酶质酶-T (TnT)是原肌球球淀粉酶质酶转换主管肌拉伸的细细的的所需肌原仟维球淀粉酶质酶。TnT的吸附的特征是判断到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化标准下，caspase-3对TnT的吸附具体情况如6如图是，与Std组（包括caspase-3和GSNO的肌原仟维）想必，caspase-3组中30 kDa TnT电影细节描写更为不错新增，体现了caspase-3参入了TnT的吸附，显然，caspase-3与GSNO的孵育导至30 kDa TnT回落。在100和200 μM GSNO组范围内是没有判断到不错的距离(P > 0.05)，而当GSNO的有机废气浓度做到400 μM 时，该电影细节描写更为不错削减(P < 0.05)。他们发现了体现了了SNO绘制语的caspase-3对TnT吸附的可抑加工用。结球淀粉酶质酶和TnT是caspase-3的敏感脆弱底物，而GSNO处里拉低caspase-3的吸附性氧很有可能导至肌原仟维球淀粉酶质酶吸附状态拉低。笔者认为所写，NO介导的S-亚硝基化不错顺利通过绘制语半胱氨酸残基来转换caspase-3的吸附性氧，故而进一部作用其对结球淀粉酶质酶和TnT的球淀粉酶质酶电离作用，故而作用鸡肉茶叶品质。

图6. S-亚硝基化caspase- 3光降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本理论研究契机论述S-亚硝基化对caspase-3绘制的干扰基本随着对牛羊肉肌原钎维身体之外吸附的干扰。核淀粉酶酶S-亚硝基化可不可以绘制caspase-3的半胱氨酸残基，然而致使caspase-3可溶性降低了，进的一步压制了其对牛羊肉肌原钎维核淀粉酶酶的核淀粉酶酶油脂水解工作能力。

三、拜谱个人心得体会

科研主要包括了酶活法测，亚硝基化呈现组学定量分析，WB等测量方式方法，感觉血清S-亚硝基化能否呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这诱发了caspase-3活力性的减少，相结一步一个脚印能够抑制了其对羊肉肌原黏胶纤维血清的血清电离效果。本科研为解说血清质亚硝基化对口感的调节管控体制作为了一大个新的移动镜头。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、体现血清质组学、代谢转化组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸品类软件，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total被氧化展现、矿酸巯基，欢迎大家咨询！

分类论文文献：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663